包蟲(chóng)病臨床診斷及病原體相關(guān)游離DNA(cfDNA)簡(jiǎn)介
一、包蟲(chóng)病簡(jiǎn)介
包蟲(chóng)病又名棘球蚴病,是一種古老的人畜共患性寄生蟲(chóng)病,主要由人感染棘球絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)所致。該疾病分為囊型包蟲(chóng)病和泡型包蟲(chóng)病兩種,分別由細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴感染引起。兩種絳蟲(chóng)都必須在哺乳類動(dòng)物體內(nèi)寄生才能完成生活史,細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的終末宿主一般為犬和狼;多房棘球絳蟲(chóng)的終末宿主一般為狐貍、犬和狼。
近年來(lái),包蟲(chóng)病呈全球性分布,我國(guó)包蟲(chóng)病主要流行于西北牧區(qū)和半農(nóng)半牧地區(qū),其中以新疆、西藏、寧夏、甘肅、青海、內(nèi)蒙古、四川7省最為嚴(yán)重。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,我國(guó)西部人群包蟲(chóng)病的感染率為3.1%~ 31.5%,患病率為0.5%~5.0%,其中青藏高原部分地區(qū)人群患病率為5.0%~10.0%。據(jù)2010年原國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)“防治包蟲(chóng)病行動(dòng)計(jì)劃(2010—2015)”,我國(guó)西部地區(qū)包蟲(chóng)病平均患病率為1.08%,受威脅人口約為6600萬(wàn),每年造成直接經(jīng)濟(jì)損失30億元。
二、包蟲(chóng)病診斷依據(jù)
根據(jù)現(xiàn)行包蟲(chóng)病診斷標(biāo)準(zhǔn),包蟲(chóng)病的臨床診斷要綜合考慮:流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查及病原學(xué)檢查幾個(gè)方面。
1.流行病學(xué)史
該部分主要考慮患者是否有在流行區(qū)的居住、工作、旅游或狩獵史,或與犬、牛、羊等家養(yǎng)動(dòng)物或狐、狼等野生動(dòng)物及其皮毛的接觸史;在非流行區(qū)有從事來(lái)自流行區(qū)的家畜運(yùn)輸、宰殺、畜產(chǎn)品及皮毛加工等暴露史。
2.臨床表現(xiàn)
患者主要的臨床表現(xiàn)為棘球蚴的囊占位所致的壓迫、刺激、囊破裂引起的一系列癥狀,囊性包蟲(chóng)病可發(fā)病全身多個(gè)器官,以肝、肺為常見(jiàn);泡型包蟲(chóng)病原發(fā)病灶幾乎都位于肝臟。
3.影像學(xué)檢查
主要為通過(guò)B超掃描、X線檢查、計(jì)算機(jī)斷層掃描或磁共振檢查發(fā)現(xiàn)占位性病變。
4.實(shí)驗(yàn)室檢查
通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)、PVC膜快速ELISA、免疫印跡技術(shù)等方法對(duì)包蟲(chóng)病相關(guān)的特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復(fù)合物進(jìn)行檢測(cè)。
5.病原學(xué)檢查
在手術(shù)活檢材料、切除的病灶或排出物中發(fā)現(xiàn)棘球蚴的囊壁、子囊、原頭節(jié)或頭鉤。此為包蟲(chóng)病的確診方法。
三、相關(guān)檢測(cè)產(chǎn)品介紹
對(duì)來(lái)源于患者或疑似患者人體樣本中的包蟲(chóng)病感染相關(guān)生物標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)是輔助診斷包蟲(chóng)病的重要手段。相關(guān)生物標(biāo)志物包括特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復(fù)合物、病原體核酸等。我國(guó)已批準(zhǔn)四個(gè)包蟲(chóng)病抗體檢測(cè)試劑,產(chǎn)品信息見(jiàn)表1,已批準(zhǔn)產(chǎn)品均采用免疫學(xué)方法對(duì)樣本中的病原體抗體進(jìn)行檢測(cè),免疫學(xué)檢測(cè)有其自身的局限性,一方面,由于細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體自身抗原存在交叉的特點(diǎn),導(dǎo)致應(yīng)用抗體檢測(cè)來(lái)區(qū)分囊型/泡型效果欠佳;另一方面,抗體檢測(cè)無(wú)法區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。隨著檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,病原體核酸及其游離DNA(cfDNA)檢測(cè)為感染的輔助診斷提供新的思路。目前,國(guó)際上尚無(wú)包蟲(chóng)病核酸檢測(cè)相關(guān)的產(chǎn)品,我國(guó)已有細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ┊a(chǎn)品獲批進(jìn)入國(guó)家藥監(jiān)局創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審查程序,該產(chǎn)品臨床應(yīng)用的安全有效性仍然在驗(yàn)證過(guò)程中。
表1 我國(guó)已批準(zhǔn)的包蟲(chóng)病檢測(cè)試劑
四、病原體相關(guān)游離DNA(cfDNA)簡(jiǎn)介
近年來(lái),隨著對(duì)寄生蟲(chóng)血漿游離DNA(cfDNA)的研究,cfDNA在寄生蟲(chóng)病的檢測(cè)中得到了快速發(fā)展,目前已有應(yīng)用cfDNA檢測(cè)對(duì)瘧原蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)、利士曼原蟲(chóng)、錐蟲(chóng)、血吸蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)感染進(jìn)行輔助診斷的報(bào)道。針對(duì)寄生蟲(chóng)感染后cfDNA的來(lái)源,可能是蟲(chóng)體或蟲(chóng)卵的細(xì)胞或碎片在增生、成熟、脫落、腐爛、崩解等過(guò)程中主動(dòng)分泌或被動(dòng)釋放出內(nèi)部的DNA進(jìn)入宿主體液循環(huán)系統(tǒng)產(chǎn)生;也有研究表明絳蟲(chóng)主動(dòng)分泌的外泌體是寄生蟲(chóng)感染后患者體內(nèi)出現(xiàn)蟲(chóng)源DNA的重要原因?;谏鲜鲅芯浚瑱z測(cè)樣本中細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體游離DNA為該疾病的輔助診斷提供了理論基礎(chǔ)。
五、檢測(cè)游離DNA的考量
寄生蟲(chóng)源cfDNA的檢測(cè)在臨床應(yīng)用中存在一定優(yōu)勢(shì),一方面,可根據(jù)特異性的基因序列對(duì)兩種不同種類的病原體進(jìn)行分型,從而達(dá)到對(duì)疾病進(jìn)行分型的目的;另一方面,患者樣本中存在寄生蟲(chóng)DNA在一定程度上可提示患者可能感染相關(guān)病原體。然而,作為一個(gè)新的標(biāo)志物,能夠應(yīng)用于臨床,在現(xiàn)有的理論基礎(chǔ)上,還應(yīng)進(jìn)一步研究。一是,應(yīng)進(jìn)一步明確患者不同疾病進(jìn)展階段血漿游離DNA濃度的變化,并以此為基礎(chǔ),確定該標(biāo)志的臨床預(yù)期用途(如:疾病早篩、輔助診斷、鑒別診斷及治療監(jiān)測(cè)等);二是,應(yīng)依據(jù)標(biāo)志物擬定的預(yù)期用途,進(jìn)一步對(duì)該標(biāo)志物進(jìn)行臨床驗(yàn)證,臨床研究應(yīng)考慮入組人群、對(duì)照方法等,如該標(biāo)志用于疾病的鑒別診斷,則入組人群應(yīng)為包蟲(chóng)病疑似人群,其中不同大小占位性病變病例、不同病灶退變(CE4、CE5)病例、不同基因型病例等均應(yīng)入組,此外還應(yīng)考慮非包蟲(chóng)病病例的干擾。用于疾病鑒別診斷用途的臨床研究其對(duì)照方法應(yīng)為疾病確診的標(biāo)準(zhǔn)即病原學(xué)檢查。
六、總結(jié)
我國(guó)包蟲(chóng)病防控形勢(shì)嚴(yán)峻,包蟲(chóng)病流行區(qū)多為相對(duì)偏遠(yuǎn)、落后的地區(qū),目前包蟲(chóng)病的診斷很大程度上依賴于影像學(xué)和病原學(xué),這不僅對(duì)臨床醫(yī)生專業(yè)技術(shù)水平要求較高,還存在一定程度的誤診、漏診的風(fēng)險(xiǎn)。血漿游離cfDNA檢測(cè)操作較為簡(jiǎn)便,結(jié)果易于解讀,如能按預(yù)期應(yīng)用于臨床,將對(duì)包蟲(chóng)病的診斷起到積極作用。
參考文獻(xiàn):
[1] 中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)外科醫(yī)師分會(huì)包蟲(chóng)病外科專業(yè)委員會(huì).肝兩型包蟲(chóng)病診斷與治療專家共識(shí)(2015版) [J] . 中華消化外科雜志,2015,14( 4 ): 253–264.
[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn). 包蟲(chóng)病診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS 257–2006).
[3] 何順偉,李曉燕,趙瑞雪等,體液游離寄生蟲(chóng)DNA在寄生蟲(chóng)病診斷中的研究進(jìn)展.中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào).2017,33(2):163–169.
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