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　　保濕是化妝品的基礎(chǔ)功效，也是我們護(hù)膚的最基本的需求。隨著人們精神生活水平的不斷提高，消費(fèi)者不斷重視對(duì)皮膚的保養(yǎng)，保濕產(chǎn)品成為了人們的首選品類。隨著《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》的正式頒布，化妝品功效宣稱不斷引起人們的關(guān)注。那如何科學(xué)、客觀的評(píng)價(jià)化妝品及其原料的保濕功效呢？下面我們將為大家匯總常見的保濕功效評(píng)價(jià)方法。

　　1.體外功效評(píng)價(jià)

　　1.1吸濕性

　　在給定溫度和相對(duì)濕度條件下，保濕劑不斷從環(huán)境中吸收水分，潮解或者形成溶液?；诨瘖y品中不同保濕劑分子對(duì)水分子的作用力不同，吸收水分和保持水分的能力也略有差異。通過稱重法測(cè)試保濕劑的吸濕率可以表征該成分的保濕功效。

　　保濕劑在一定時(shí)間吸收的水分重量占該保濕劑重量的百分比，為此保濕劑在該時(shí)間內(nèi)該相對(duì)濕度下的吸濕率。一般采用飽和硝酸鉀溶液維持94%的相對(duì)濕度。將涂抹有受試物的玻璃板置于簡(jiǎn)易恒濕器的多孔隔板上，并保證隔板上下空氣的流通，放置一段時(shí)間后（2、4、6、8h）取出、稱重，計(jì)算吸濕率。

　　本方法適用于吸水性保濕原料或含有該類型保濕成分的保濕產(chǎn)品的吸濕率測(cè)定。油脂類保濕劑和水劑、乳液等含水量較高的產(chǎn)品不宜采用該方法。

　　1.2保濕性

　　保水率為在某一固定相對(duì)濕度的前提下，樣品放置不同時(shí)間后（樣品放置后的質(zhì)量-樣品放置前的質(zhì)量）/樣品放置前的質(zhì)量*100%，反應(yīng)產(chǎn)品隨時(shí)間的變化所呈現(xiàn)的吸濕性的大小。

　　不同保濕劑分子對(duì)水分子的作用力不同，保持水分的能力也略有差異。試驗(yàn)常采用稱重法測(cè)試失水率表征保濕劑的保水能力，從而表征化妝品及其原料保持水分的能力大小。采用一定體積的飽和碳酸鉀溶液維持約43%的相對(duì)濕度。稱取一定量受試物溶液，均勻涂覆在貼有3M膠帶的玻璃板上，放置一段時(shí)間后（2、4、6、8h）稱量受試物的重量，計(jì)算失水率。失水率越大表示該保濕劑的保水性越差。失水率越小表示該保濕劑的保水性越強(qiáng)，長(zhǎng)期保濕效果越好。

　　本方法適用于吸水性保濕原料或含有該類型保濕成分的保濕產(chǎn)品的失水率測(cè)定，油脂類保濕劑或含水量較低的膏霜類產(chǎn)品不宜采用該方法。

　　1.3吸濕穩(wěn)定性

　　理想的保濕劑除了能在周圍環(huán)境中吸收水分，在一般濕度下保持水分外，還需要具備其吸收的水分隨著相對(duì)濕度變化較小的特點(diǎn)。當(dāng)外界相對(duì)濕度變小時(shí)，如果保濕劑的吸收水分的能力變小將會(huì)導(dǎo)致皮膚干燥。吸濕穩(wěn)定性的測(cè)定一般稱取同質(zhì)量的某一固定保濕劑，將其放置在不同相對(duì)濕度的環(huán)境中，一段時(shí)間后比較其各自的吸濕量。如果不同環(huán)境中的吸濕量變化不大，表明該保濕劑的吸濕穩(wěn)定性好。

　　1.4皮脂分析

　　皮脂膜是由皮膚表面的皮脂與汗液和水乳化后在皮膚表面形成的乳化皮脂薄膜，覆蓋在皮膚和毛發(fā)的表面。皮脂膜像一層無(wú)形的屏障影響皮膚的健康。皮脂膜可有效滋潤(rùn)皮膚，使皮膚柔韌、潤(rùn)滑、富有光澤、防止干裂。另外，皮脂膜可防止皮膚水分過度蒸發(fā)、防止外界水分及其他物質(zhì)大量進(jìn)入，鎖住水分，阻止?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)、保濕因子及水分的散失，使皮膚含水量保持正常，對(duì)皮膚鎖水功能起到重要的屏障功能。

　　皮膚表面皮脂成分含量：甘油三酯約占20-60%、蠟脂約占23-29、角鯊烯約占10-14、游離脂肪酸約占5%-40%、膽固醇及膽固醇酯約占1-5%。皮膚表面脂質(zhì)受多種因素的影響，皮脂成分含量也是在一定范圍內(nèi)變動(dòng)。通常情況下，通過分析神經(jīng)酰胺、膽固醇、脂肪酸含量及其比例，分析皮脂成分是否存在偏頗，可間接反應(yīng)皮脂膜的健康狀態(tài)。

　　1.5天然保濕因子（NaturalMoisturizingFactor，NMF）

　　NMF是存在于角質(zhì)層內(nèi)與水結(jié)合的一些低分子量物質(zhì)的總稱，包括氨基酸、吡咯烷酮羧酸、乳酸、尿素、尿刊酸、離子碳水化合物、氨、多態(tài)、葡糖胺及其他未知物質(zhì)，是一類皮膚自身存在的、具有吸水特性的小分子復(fù)合物。與皮膚水合作用密切相關(guān)的NMF中最具代表性的為PCA、UCA、Urea，可以吸收大量的水分并保持水分不被散失。NMF作為一種低分子量水溶性的高效吸濕性分子化合物，能幫助角質(zhì)細(xì)胞吸收水分，維持水合功能。

　　對(duì)NMF的定量測(cè)試常見的方法為：1.利用膠帶剝脫，采用高效液相色譜、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)剝脫下的角質(zhì)層細(xì)胞中UCA、PCA等成分進(jìn)行分析，2.基于保濕的原理，從二維\三維細(xì)胞水平檢測(cè)與保濕相關(guān)基因的表達(dá)情況，利用3D皮膚模型直接檢測(cè)皮膚角質(zhì)層中PCA、UCA、Urea的含量變化，再利用相似相容原理，采用高效液相色譜對(duì)角質(zhì)層PCA、UCA、Urea進(jìn)行分離和檢測(cè)。

　　1.6皮膚屏障相關(guān)蛋白及其基因表達(dá)

　　人體正常的皮膚有兩方面的屏障功能：一方面抵御外界各種物理、化學(xué)和生物等有害物質(zhì)對(duì)皮膚的侵害，對(duì)酸、堿、有機(jī)溶劑及物理性摩擦具有一定的抵抗力；另一方面對(duì)外界物質(zhì)的吸收、內(nèi)部物質(zhì)的流失具有明顯的限制作用，可阻止體液外滲與化學(xué)物質(zhì)的內(nèi)滲，防止水分散失。皮膚屏障受損表觀上將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞連接松散、易脫落，細(xì)胞間緊密連接能力變?nèi)?，角質(zhì)細(xì)胞表面TEWL升高，皮膚保水能力下降，皮膚變的敏感、脆弱。所以，皮膚屏障功能在保持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定上起著重要的作用。

　　皮膚屏障功能主要依靠角質(zhì)層的“磚墻結(jié)構(gòu)”。角質(zhì)層的主要成分是角蛋白和脂質(zhì)緊密有序的排列。所以，對(duì)皮膚屏障功能的檢測(cè)可以通過測(cè)定相關(guān)蛋白的表達(dá)間接反應(yīng)皮膚的水合力、保水力。與皮膚屏障直接相關(guān)的蛋白主要包含：角蛋白、絲聚合蛋白、外皮蛋白、兜甲蛋白、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、緊密連接蛋白-1等。其檢測(cè)方法主要包含：定量即時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（QuantitativeReal-timePolymeraseChainReaction，qRT-PCR）、免疫細(xì)胞化（Immunocytochemistry，ICC）/免疫熒光（Immunofluorescence，IF）、免疫組化。

　　1.7水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）

　　皮膚固有的水合能力不僅由于角質(zhì)細(xì)胞中NMF的存在，還依賴于皮膚內(nèi)水分的運(yùn)輸。AQPs是一類膜蛋白家族，可選擇性地轉(zhuǎn)運(yùn)水和小分子溶質(zhì)（如甘油）。

　　在人體皮膚中，AQP-3是AQPs家族表達(dá)最豐富的水通道蛋白亞型。其在表皮的表達(dá)量具有空間層次，主要表達(dá)于人表皮基底層，棘層、顆粒層，到角質(zhì)層逐漸消失。AQP-3在基底膜帶的高表達(dá)，可以促使水，甘油及尿素的轉(zhuǎn)運(yùn)，擔(dān)負(fù)著角質(zhì)層甘油運(yùn)輸?shù)闹匾饔谩QP-3將內(nèi)源性的甘油以及皮脂腺中的甘油三酯運(yùn)輸進(jìn)入表皮，使其直接或間接影響皮膚保濕功效。

　　通過抗原抗體的特異性結(jié)合，可以用熒光基團(tuán)標(biāo)記出表皮細(xì)胞表達(dá)的AQP3，熒光強(qiáng)度即對(duì)應(yīng)了該蛋白的表達(dá)量，同時(shí)，通過定量即時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定其mRNA的表達(dá)，從而可以一定程度上反映出皮膚轉(zhuǎn)運(yùn)水分的能力。

　　2.人體功效評(píng)價(jià)方法

　　2.1皮膚水分含量及其分布

　　皮膚水分含量的測(cè)試可以直接反應(yīng)保濕產(chǎn)品的保濕效果。目前測(cè)試皮膚水分含量的方法主要有電化學(xué)法、光譜法。

　　電化學(xué)法測(cè)定水分含量多采用電容法、電阻法、電導(dǎo)法。主要儀器包括德國(guó)CK公司的CorneometerCM825、皮膚水分分布測(cè)試儀MoistureMapMM100、芬蘭的MoistureMeter、Biox公司的Epsilon介電成像系統(tǒng)、日的Skicon-200EX皮膚電導(dǎo)測(cè)試儀等。其中，采用電容法測(cè)定人體皮膚角質(zhì)層的水分含量是基于水和其他物質(zhì)的介電常數(shù)差異顯著，按照皮膚角質(zhì)層水分含量的不同，測(cè)得的皮膚的電容值不同，其參數(shù)可代表皮膚水分含量。

　　光譜法測(cè)定皮膚水分含量主要包括：拉曼共聚焦顯微鏡、近紅外光譜法（nearInfrared,NIR）、衰減全反射-傅里葉變換紅外光譜法（attenuatedTotalReflectionFlouriertransformedInfraredSpectroscopy）ATR-FTIR、共振頻率法（ResonanceFrequencymethod）。其中，應(yīng)用較多的為拉曼共聚焦顯微鏡測(cè)定皮膚水分含量。共聚焦拉曼光譜是基于皮膚對(duì)光的拉曼散射得到光譜圖，通過檢測(cè)CH鍵（2800-3000cm-1）和OH鍵（3100-3700cm-1）的信號(hào)強(qiáng)度比例進(jìn)而通過計(jì)算得到水分含量值。皮膚含水量越高，得到的譜圖中水分的吸收峰強(qiáng)度越強(qiáng)。其優(yōu)勢(shì)是可實(shí)現(xiàn)在體、實(shí)時(shí)、無(wú)創(chuàng)測(cè)試，受試物不受其劑型限制、無(wú)需復(fù)雜的樣品預(yù)處理、可實(shí)現(xiàn)分子層面的逐層分析。同時(shí)，也可通過分析使用產(chǎn)品前后皮膚拉曼光譜的變化，定性或半定量分析物質(zhì)的經(jīng)皮吸收情況。

　　2.2皮膚經(jīng)皮水分散失（TransepidermalWaterLoss，簡(jiǎn)稱TEWL）

　　TEWL又稱透皮失水率，是指水分從真皮層經(jīng)表皮層，在單位時(shí)間內(nèi)流失水分的速度。TEWL對(duì)評(píng)估皮膚水分保護(hù)層的功能是非常重要的參數(shù)，在國(guó)際上已經(jīng)得到了廣泛的認(rèn)可。

　　皮膚生理和功能上的變化常導(dǎo)致皮膚屏障功能的損傷，同樣，皮膚屏障功能異常也常會(huì)導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)生理及功能上的變化。例如：皮膚屏障受損表觀上將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞連接松散、易脫落，細(xì)胞間緊密連接能力變?nèi)?，角質(zhì)細(xì)胞表面TEWL升高，皮膚保水能力下降，皮膚變得敏感、脆弱。TEWL是較常用的表征皮膚水分散失的方法。皮膚屏障功能越好，TEWL的數(shù)值就越低，反之亦然。所以，評(píng)價(jià)化妝品或者化妝品原料對(duì)皮膚屏障功能的改善可以通過使用產(chǎn)品前后TEWL值的變化評(píng)估皮膚屏障功能。目前，檢測(cè)TEWL的儀器目前主要分為開放式探頭和封閉式探頭兩大類。分別為CK公司的皮膚水份流失測(cè)試儀TewameterTM300、Delfin公司的Vapometer和Biox公司的AquafluxAF200。

　　2.3皮膚鱗屑指數(shù)

　　皮膚缺水常導(dǎo)致皮膚表面鱗屑的產(chǎn)生。為將保濕后的效果通過科學(xué)的手段，可視、可觸、可感知的傳遞給消費(fèi)者，我們常常采集皮膚鱗屑照片，通過分析皮膚鱗屑指數(shù)判斷產(chǎn)品的滋潤(rùn)、保濕功效。常用的儀器為CK公司推出的皮膚顯微表面活性分析系統(tǒng)VisioscanVC98。Visioscan?VC98可以用來測(cè)試受試者使用產(chǎn)品后面部或其他區(qū)域的灰度參數(shù)以及SELS參數(shù)，反映皮膚的狀態(tài)（如皮膚光滑度、皺紋等）變化。其中，SEsc指標(biāo)表示皮膚鱗屑指數(shù)，可表征皮膚的滋潤(rùn)程度。數(shù)值越小，角質(zhì)層的鱗屑指數(shù)越小，皮膚越滋潤(rùn)。

　　2.4角質(zhì)層剝脫指數(shù)

　　當(dāng)角質(zhì)層表層細(xì)胞的橋粒消失，細(xì)胞間連接松動(dòng)時(shí)，扁平的角質(zhì)細(xì)胞就會(huì)呈鱗屑狀從皮膚表面脫落，形成皮屑，通過分析皮屑剝脫的速率和皮屑的形狀可以評(píng)估皮膚的干燥程度和皮膚屏障的完整性。VisioscanVC98也可以用來進(jìn)行角質(zhì)細(xì)胞剝落的測(cè)試，分析得到的圖片參數(shù)Sesc可反映皮膚角質(zhì)剝落程度，Sesc數(shù)值越小，說明皮膚角質(zhì)層的剝落越小，皮膚屏障越好。

　　以上是為大家匯總的常用的保濕功效評(píng)價(jià)方法。目前國(guó)內(nèi)對(duì)保濕功效常常采用行標(biāo)QB/T4256-2011，選取24人~30人，采用電容法測(cè)定皮膚涂抹樣品后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的皮膚角質(zhì)層水分含量。另外，對(duì)保濕的功效評(píng)價(jià)，企業(yè)還可根據(jù)產(chǎn)品的作用機(jī)理，選擇體外、人體等試驗(yàn)，更加直觀的反應(yīng)產(chǎn)品的保濕功效。

　　延伸閱讀

　　保濕與美白、抗衰、皮膚屏障的關(guān)系

　　保濕作為基礎(chǔ)功效對(duì)皮膚起到至關(guān)重要的作用，然而做好保濕還會(huì)有哪些意想不到的效果呢？接下來我們就一起探討保濕與美白、抗衰、皮膚屏障之間的關(guān)系。

　　首先，保濕與皮膚的潤(rùn)澤度有著直接的關(guān)系。皮膚的潤(rùn)澤度與表皮所含水分含量密切相關(guān)。皮膚缺水常會(huì)導(dǎo)致皮膚表觀暗淡、粗糙、無(wú)光澤。水含越高，皮膚充盈性越好，光澤度越高，皮膚越通透。所以，皮膚潤(rùn)澤度與皮膚水分含量呈明顯相關(guān)性。以水亮膚色，可以提升肌膚光澤度。

　　其次，保濕對(duì)皮膚的抗衰老也起著重要的作用。皮膚出現(xiàn)衰老癥狀主要原因是：皮膚真皮層的主要組成物質(zhì)膠原蛋白、網(wǎng)狀纖維、彈性纖維和含有粘多糖的基質(zhì)對(duì)維持皮膚正常的韌性、彈性、充盈飽和程度具有關(guān)鍵的作用，若真皮層含水量降低將影響彈力纖維的彈性，膠原纖維也容易發(fā)生斷裂，從而引起皮膚的彈性下降、皺紋增多。同樣，若真皮層中的透明質(zhì)酸、粘多糖等物質(zhì)變性也會(huì)直接導(dǎo)致真皮層含水量減少，導(dǎo)致皮膚的干燥、無(wú)光澤。主要原因?yàn)槔w維間基質(zhì)中的粘多糖和蛋白復(fù)合體可以結(jié)合大量的水，是真皮組織保持水分的基礎(chǔ)，若這些大分子物質(zhì)受到破壞會(huì)最終導(dǎo)致皮膚結(jié)合水的能力受損。

　　保濕對(duì)皮膚屏障也起著至關(guān)重要的作用。皮膚的屏障功能作為皮膚的六大功能之一，對(duì)預(yù)防外界刺激、保護(hù)肌膚至關(guān)重要。皮膚缺水可導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)發(fā)癢、紅腫、脫屑的臨床癥狀，最終導(dǎo)致皮膚敏感、皮膚屏障功能的受損。其主要原因?yàn)椋航琴|(zhì)層缺水變薄，外界有害物質(zhì)（細(xì)菌、病毒等）可以通過角化細(xì)胞或者其間隙以及毛囊、皮脂腺等侵入皮膚引起皮膚過敏。角質(zhì)層增厚可以明顯抑制有害物質(zhì)的侵入，避免細(xì)菌、病毒等物質(zhì)的侵入引起的皮膚敏感，角質(zhì)層愈厚對(duì)侵入的限制作用愈大。正常皮膚pH維持在4.5-6.5之間，弱酸性環(huán)境對(duì)維持皮膚正常的生理功能，防止微生物（特別是病原體微生物）的侵襲具有較重要的防護(hù)作用。如果皮膚缺水，導(dǎo)致水油不平衡，皮膚表面的pH發(fā)生變化，將會(huì)導(dǎo)致皮膚容易敏感。

　　除此之外，水分含量增加還可以起到抗炎、抗細(xì)胞分裂和止癢的作用。保濕類產(chǎn)品在增加皮膚水分含量的同時(shí)還能夠增加皮膚表面的細(xì)膩度、柔韌度、平滑度及彈性，改善皮膚的粗糙度，并延長(zhǎng)這種效果的持續(xù)時(shí)間。

(責(zé)任編輯：楊畦)